Après une formation à L’INSAS à Bruxelles (1983-1987), Isabelle Gyselinx assure divers assistanats à la mise en scène, notamment pour Jean-Claude Drouot au TNB et pour Isabelle Pousseur à l’Atelier Ste Anne et au Théâtre de la Place. A partir de 1990, elle réalise diverses mises en scènes au Théâtre de la Place : Broll (1991) de François Sikivie, Le Vieillard jaloux dans le spectacle Le plaisant voyage (1996), John et Joe de Agota Kristof (2003), Avalanche de Tuncer Cucenoglu (2010) . Elle assure également des mises en scène pour la Mezza Luna, Nuitnottenacht (1995), Clash (1998) et pour le Zététique théâtre, Narcisse et moi et moi et moi (1993-1994) ainsi que pour le Théâtre de Poche, Les contes urbains (2001). En 1997, elle crée la compagnie Paf le chien et le spectacle éponyme au Théâtre Océan nord. Elle met en scène Gaspard de Peter Handke (2002) au Théâtre de la Place, L’Instruction de Peter Weiss (2005) au Théâtre de la Place (distribution rwandaise, tournée aux Bouffes du Nord, au Young Vic Theater de Londres, au Rwanda, au Japon, aux Etats-Unis).
Elle assume également des activités pédagogiques en Belgique (professeur d’art dramatique à l’ESACT/Conservatoire de Liège) et à l’étranger (Moscou, Rwanda, République démocratique du Congo).